Hledej Zobraz: Univerzity Kategorie Rozšířené vyhledávání

12 659   projektů
0 nových

Polymerázová řetězová reakce

«»
Přípona
.doc
Typ
studijní materiál
Stažené
0 x
Velikost
1,1 MB
Jazyk
český
ID projektu
9029
Poslední úprava
14.11.2016
Zobrazeno
680 x
Autor:
goldenlife
Facebook icon Sdílej na Facebooku
Detaily projektu
Popis:
8. Polymerázová řetězová reakce

V osmdesátých letech 20. století byla vynalezena nová, rychlá a účinná metoda pro klonování DNA - polymerázová řetězová reakce (PCR, angl. polymerase chain reaction). Pomocí této metody můžeme rychle a vysoce selektivně namnožit konkrétní nukleotidové sekvence obsažené v jakékoli DNA (deoxyribonukleové kyselině) za podmínek in vitro. Metoda PCR je dnes hojně využívána např. v diagnostice při analýze onemocnění nebo při průkazu specifických úseků v DNA.

8.1. Princip metody PCR
Princip PCR je založen na využití enzymu DNA-polymerázy pro opakované kopírování templátové (vzorové) molekuly DNA. Syntéza je řízena krátkými oligonukleotidy (primery), které nasedají na templátovou DNA na začátku a konci amplifikovaného fragmentu, každý primer reaguje s jiným vláknem původní dvouřetězcové DNA (viz. obr. 22).

Klíčová slova:

polymerázová řetězová reakce

izolace templátové DNA

izolace

systém kontrol

elektroforéza

využití metody



Obsah:
  • Polymerázová řetězová reakce
    Princip metody PCR
    Základní pojmy
    Provedení metody PCR
    Izolace templátové DNA
    Lýza bakteriálních buněk varem
    Extrakce DNA chelexem
    Izolace chromozomální DNA fenolovou extrakcí
    Izolace DNA pomocí purifikačních kolonek
    Příprava PCR reakční směsi
    Systém kontrol PCR reakce
    Horizontální gelová elektroforéza
    Příprava agarózového gelu
    Elektroforéza
    Vyhodnocení PCR
    Využití metody PCR v mikrobiologii potravin
O souborech cookie na této stránce

Soubory cookie používáme pro funkční účely, pro shromažďování a analýzu informací o výkonu a používání stránky.

Nastavení Povolit vše